凝膠成像系統(tǒng)是通過(guò)紫外或白光光源對(duì)樣品進(jìn)行光激發(fā)，由科學(xué)級(jí)CCD相機(jī)和專(zhuān)業(yè)的大光圈鏡頭對(duì)樣品所發(fā)射的光通過(guò)特定波長(zhǎng)濾光片后進(jìn)行捕捉，從而進(jìn)行成像。具體從使用分析的角度來(lái)看，凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規(guī)研究。
1、分子量定量
對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNAMarker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。此方法也適用于對(duì)PAGE蛋白膠條帶的分子量測(cè)定。
2、密度定量
一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PAGE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
3、密度掃描
在分子生物學(xué)和生物工程研究中,常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用專(zhuān)用的密度掃描,但利用生物分析軟件，結(jié)合白光照射的凝膠成像獲取圖片，就能完成此項(xiàng)工作。
4、PCR定量
PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類(lèi)似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
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更新時(shí)間：2022-05-20
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